免疫細(xi)胞(bao)化學是一種利用(yong)特異(yi)性抗(kang)體(ti)體(ti)檢測抗(kang)原, 并且(qie)可以在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)內抗(kang)原定位(wei)的方法。在(zai)IC中經(jing)常會(hui)使(shi)用(yong)熒光進行檢測。
主要有兩種方法(fa):直接(jie)法(fa)、間接(jie)法(fa)。
直接法(fa):是直接在第一抗體上附(fu)上熒光標記 進行檢(jian)測(直接法(fa))。
間接法:是熒光標(biao)記的第二抗體(ti)與第一抗體(ti)反應并(bing)進行(xing)檢測。
使用直(zhi)接法時,通(tong)過熒光染(ran)(ran)色(se)可(ke)以更容易的進行多(duo)重(zhong)染(ran)(ran)色(se)。在這種情況下,我們需(xu)要找到熒光間不會相(xiang)互干(gan)擾的組合。
直接法(fa)的優點: 1.特別是使用熒光標記的第(di)一抗體 時,易于進行(xing)多重(zhong)染(ran)色。
2.不會出(chu)現第二抗體引起的非特異性染色。
3.可以縮短操作時(shi)間(jian)。
間(jian)接法的優點(dian):
如果使用(yong)(yong)的(de)第一抗體來自(zi)相(xiang)同的(de)宿(su)主,那么(me)可以(yi)使用(yong)(yong)相(xiang)同的(de)標(biao)記第二抗體,且較為(wei)通用(yong)(yong)。
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