問：原代(dai)細胞(bao)和細胞(bao)系有什么區別？

答：原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)直接源(yuan)自組織(zhi)，一旦培養(yang)，原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)壽命是有限的(de)。原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是理想(xiang)的(de)，因為它(ta)們保留了體(ti)內(nei)觀察到的(de)許(xu)多標記。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)是不斷生(sheng)長和(he)復制并(bing)經歷遺傳(chuan)轉化的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群，具有無限的(de)生(sheng)長潛力。出于醫學(xue)和(he)/或研究目(mu)的(de)，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)已在(zai)體(ti)外(wai)維(wei)持。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)可以通過非(fei)常(chang)(chang)大量(liang)的(de)傳(chuan)代(dai)(dai)培養(yang)進行(xing)培養(yang)，并(bing)且(qie)在(zai)非(fei)常(chang)(chang)高的(de)傳(chuan)代(dai)(dai)次數下可能會(hui)發(fa)生(sheng)進一步的(de)基因型/表(biao)型變化。一般來(lai)說，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)缺(que)乏體(ti)內(nei)觀察到的(de)許(xu)多標記，并(bing)且(qie)也顯示出與原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)非(fei)常(chang)(chang)不同的(de)標記譜。

問(wen)：ScienCell 如(ru)何確認細胞類型？

A. 細(xi)胞(bao)類(lei)型可以通過多種方式確認。細(xi)胞(bao)形態學非常(chang)重要，可以幫助(zhu)我們識(shi)(shi)別(bie)(bie)正確的細(xi)胞(bao)。此外，我們的質(zhi)量控制部門(men)使用免疫熒(ying)光來確認特定細(xi)胞(bao)類(lei)型的識(shi)(shi)別(bie)(bie)標記(ji)的存在(zai)。免疫熒(ying)光也(ye)可用于識(shi)(shi)別(bie)(bie)污染(ran)細(xi)胞(bao)。

問：我可(ke)以(yi)獲得(de)有關我的(de)批次細胞的(de)哪些捐贈(zeng)者信息？

答：我們保存所有人類和(he)動物原代細胞的記錄。如果(guo)您有特定要求（年齡(ling)和(he)/或性別），請在訂購前聯系我們的客(ke)戶服務部門。

問：我(wo)們(men)是否(fou)對(dui)我(wo)們(men)的細胞進(jin)行(xing)人(ren)類白(bai)細胞抗原(yuan)分型？

答：人(ren)類白細胞抗原(yuan) (HLA) 分型是一種(zhong)確定一個人(ren)的(de)組(zu)織與(yu)另(ling)一個人(ren)的(de)組(zu)織匹配程度(du)的(de)方法。我(wo)們目前不(bu)在 ScienCell 研究實(shi)驗室對此進行測試(shi)。

問：我的原代細胞(bao)瓶是否 100% 純？

答：原代細(xi)(xi)胞(bao)永(yong)遠不會是 100% 純(chun)的，但(dan)是，我(wo)們會盡力獲得盡可能(neng)純(chun)的細(xi)(xi)胞(bao)。總(zong)是存在污染細(xi)(xi)胞(bao)。

問：我需要多少經驗才能開始使用正常原代(dai)細(xi)胞？

答：強(qiang)烈推薦具有(you)在無菌條件下使用層流(liu)罩(zhao)工作的經驗(yan)，并且具有(you)使用其他細(xi)胞類型的經驗(yan)是(shi)有(you)利的。如果您是(shi)細(xi)胞培(pei)養的初學者或想建立細(xi)胞培(pei)養實(shi)驗(yan)室(shi)，我們(men)可以為您提供幫助。請聯系(xi)我們(men)的細(xi)胞培(pei)養專家。

問：收(shou)到(dao)后我應該如(ru)何處理冷凍保存的細胞(bao)？

A. 收到包裹后，立即將(jiang)冷(leng)凍保存的細胞從(cong)干冰(bing)運輸容器(qi)轉移(yi)至液氮(dan)中(zhong)。快速從(cong)運輸容器(qi)轉移(yi)到液氮(dan)中(zhong)，以防止細胞解(jie)凍。請(qing)勿將(jiang)細胞儲(chu)存在(zai) -20°C 或 -80°C 下，因為這會對(dui)細胞造成不可逆轉的損壞。

問：當我第一次對凍存(cun)細胞進行(xing)平板培養時(shi)，是否需要離心細胞以去除 DMSO？

答：我們(men)不建(jian)議通過離(li)心(xin)細(xi)胞(bao)來去除 DMSO 殘留物。離(li)心(xin)過程對細(xi)胞(bao)的危害可能(neng)比 DMSO 殘留物更(geng)大，特(te)別是如(ru)果使用(yong)不適當的高速(su)。當您鋪(pu)板(ban)(ban)細(xi)胞(bao)時(shi)，DMSO 將(jiang)在培養(yang)(yang)基(ji)中充分稀釋。例如(ru)，如(ru)果將(jiang)整個冷凍管（1 毫升）細(xi)胞(bao)放入裝(zhuang)有 15 毫升培養(yang)(yang)基(ji)的 T-75 燒瓶(ping)中，則 DMSO 濃(nong)(nong)度將(jiang)低于 0.67% (v/v)。如(ru)果以 5000 - 10,000 個細(xi)胞(bao)/cm2 鋪(pu)板(ban)(ban)細(xi)胞(bao)，DMSO 的濃(nong)(nong)度會更(geng)低。

問：我應(ying)該使用什么類型的培養箱(xiang)來培養 ScienCell 原代細胞？

我們建議使用 37°C、5% CO ₂培養箱培養來自 ScienCell 的所有原代細胞。所有 ScienCell 培養基都需要 5% CO ₂來維持(chi)細胞的最(zui)佳 pH 值。

問：如何用(yong)冷凍(dong)保存的細胞建立培養物？

A. 注(zhu)意(yi)：詳細說明請(qing)參(can)閱電池產品表。

1. 從液(ye)氮中取出一小(xiao)瓶細胞(bao)，注意保護手和眼睛(jing)。

2. 將小瓶上的(de)蓋(gai)子擰松 1/4 圈 10 秒，以釋放可能滯留在螺紋中的(de)液氮，然(ran)后(hou)重新擰緊蓋(gai)子。

3. 將冷凍小瓶(ping)放入 37°C 水浴中(zhong)。握(wo)住并輕輕旋轉小瓶(ping)，直至內容物全部解凍。迅速從水浴中(zhong)取出(chu)小瓶(ping)，用 70% 乙醇擦拭(shi)，然(ran)后轉移至無菌區。

4. 小心(xin)地(di)取下蓋子，不要接觸內(nei)螺紋。輕(qing)輕(qing)地(di)將小瓶中的(de)內(nei)容物重(zhong)新懸(xuan)浮(fu)并分(fen)配到(dao)含有培養基的(de)平衡的(de)聚-L-賴(lai)氨酸或(huo)纖連蛋白(bai)包被的(de)培養容器(qi)中（請參閱產品表上列(lie)出的(de)具體(ti)說(shuo)明）。

5. 蓋(gai)上培(pei)養容(rong)器(qi)的蓋(gai)子或蓋(gai)子，輕輕搖動容(rong)器(qi)以(yi)使細胞均勻分布。如有必(bi)要，松開蓋(gai)子以(yi)進行氣體交換(huan)。

6. 將培養(yang)容器放回培養(yang)箱(xiang)（37°C，5% CO2/95% 空(kong)氣）。

7. 為了獲得最佳結果，培養開始(shi)后至少 16 小時內(nei)不要擾(rao)動培養。第(di)二(er)天刷新培養基以去除(chu)殘(can)留(liu)的(de) DMSO 和未貼壁的(de)細(xi)胞（除(chu)非產品表上另有說明）。

問：我應該向細胞培(pei)養瓶(ping)中添加多少體(ti)積的(de)培(pei)養基？

A. 建議(yi)在(zai) T-25 燒(shao)瓶中添加 5 ml 培(pei)養基(ji)，在(zai) T-75 燒(shao)瓶中添加 15 ml 培(pei)養基(ji)，在(zai) T-150 燒(shao)瓶中添加 30 ml 培(pei)養基(ji)。

問：我應該多久更換一(yi)次原代(dai)細胞(bao)的細胞(bao)培養基？

答：請參(can)閱(yue)您正在(zai)使用(yong)的細胞類型(xing)的產品表以獲取具體說明。一(yi)般來(lai)說，根據細胞的融合情況，每 2-3 天更換一(yi)次培(pei)養基。注意(yi)：冷(leng)凍保存的細胞解(jie)凍并鋪板后(hou)(hou)，應在(zai)約 16 小時后(hou)(hou)進行第一(yi)次培(pei)養基更換，以去除 DMSO 殘留和(he)死細胞。

問(wen)：我應(ying)該(gai)在(zai)什么匯(hui)合處傳(chuan)代細胞？

答：這取(qu)決于細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)類型。例如(ru)，內皮(pi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)永遠不應該(gai)變得太(tai)匯(hui)合(he)（90%-100%），因(yin)為這會促(cu)進(jin)污染細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)生長(chang)并導致內皮(pi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)衰老(lao)。另一(yi)方(fang)面(mian)，成(cheng)纖維細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)可(ke)以(yi)在較(jiao)高的(de)匯(hui)合(he)度(du)（90%-98%）下(xia)進(jin)行傳代培養，并且不會受到(dao)較(jiao)高匯(hui)合(he)度(du)的(de)不利影(ying)響。一(yi)般來說，原代細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)不應該(gai)變得太(tai)匯(hui)合(he)，因(yin)為這會導致細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)衰老(lao)并促(cu)進(jin)污染細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)生長(chang)。

問：正(zheng)常原代細胞的推薦分(fen)流比是多少？

答：ScienCell 研究實驗室不推薦(jian)正常(chang)細胞(bao)的分流(liu)比，因為胰(yi)蛋白酶(mei)消(xiao)化(hua)后(hou)(hou)的細胞(bao)數量各不相同。我們(men)建(jian)議在(zai)胰(yi)蛋白酶(mei)消(xiao)化(hua)后(hou)(hou)對(dui)細胞(bao)進行計數，并按照產品(pin)表(biao)上針對(dui)特定細胞(bao)類型推薦(jian)的接(jie)種密(mi)度接(jie)種細胞(bao)。

問：群體倍增(zeng)和傳代次數有什么區別？

答(da)：群體倍增(zeng)是指培養物中細胞(bao)總(zong)數(shu)增(zeng)加兩倍，最常在(zai)指數(shu)或“對數(shu)"生(sheng)長階段(duan)提及。術語傳(chuan)代次數(shu)是指將細胞(bao)群從培養容器(qi)中取(qu)出并進行傳(chuan)代培養（傳(chuan)代）過程的次數(shu)，以保持細胞(bao)處于足夠(gou)低的密度(du)以刺激進一步生(sheng)長。

問：我可以使用正常原(yuan)代細胞進行多少(shao)次傳代？

答：ScienCell 不(bu)使用術語“傳代(dai)"來描述增(zeng)長(chang)潛(qian)力，因為每個客戶(hu)使用不(bu)同的(de)分流比。ScienCell 研究(jiu)實(shi)驗室在細胞產品表上標出了(le)預期的(de)群(qun)體倍增(zeng)次數。

問(wen)：非增殖細胞可以傳(chuan)代(dai)培養嗎？

A. 非增殖細胞(bao)不(bu)能進行傳代培(pei)養，因為它們不(bu)增殖。這(zhe)包括以下(xia)細胞(bao)類(lei)型：神(shen)經元(yuan)、小膠質細胞(bao)、巨噬細胞(bao)和(he)其他一些(xie)細胞(bao)類(lei)型。產品表(biao)將表(biao)明細胞(bao)是否不(bu)增殖。

問：我可(ke)以重新冷凍 ScienCell 的正(zheng)常原(yuan)代(dai)細胞(bao)嗎？

答(da)：我們不建議客戶重(zhong)新冷凍 ScienCell 的人類和(he)動物原(yuan)代(dai)細胞(bao)。

北京和一生物(wu)科技有限公司專業代理(li)antibodiesinc全系列產(chan)品(pin)，專營進口生物(wu)(wu)試劑(ji)，科學(xue)儀(yi)器，實驗消耗品(pin)，化工(gong)原(yuan)料及藥物(wu)(wu)中間體等(deng)。公司與諸多國外品(pin)牌簽下代理，sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等，能為廣大科(ke)研用戶(hu)提(ti)供數萬種試劑、儀(yi)器和實驗消(xiao)耗品。

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